哺乳动物细胞培养 |
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哺乳动物细胞的培养方法有许多种,用于生产不同规模的治疗和诊断蛋白。细胞可以在细胞发生器或 |
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发酵罐中培养。 纯化的第一步是除去细胞,细胞碎片和颗粒,然后再进入下一步工序。这一步可以采用 |
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切向流超滤(TFF),也可采用常规过滤(NFF)。对于最初的澄清,是采用TFF还是NFF,主要取决于投料 |
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的批量和使用频率(每年的投料批数)。如果投料量较小(例如少于1000公升/批)或使用频率较低,NFF |
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通常是较好的选择。因为,相对于TFF的硬件投资及滤膜.重复使用的验证支出,一次性过滤器的成本比较 |
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低。反之,对于批量大、使用频率高的情况,选择TFF更经济,因为膜的成本可以由大量的产品来分摊。 |
分离目的: |
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(澄清过滤)经济有效地除去细胞、细胞碎片和颗粒除菌过滤。 |
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(预过滤) 在进一步纯化前,减少生物负荷或除菌。 |
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应用要求: |
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由于颗粒含量大,颗粒大小分布范围广,一级过滤很难除去所有的颗粒。在许多情况下,采用2-3级过 |
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滤来分担颗粒负荷,是更为经济的方法。 |
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过滤器推荐: |
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初级过滤去除细胞和细胞碎片,可使用 聚偏二氟乙烯 或 纤维素纤维 深层过滤器。 |
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二级过滤(精滤)在除菌过滤或层析前降低胶质颗粒的负荷。通常,使用纤维素纤维深层过滤器做为除 |
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菌过滤或层析之前的过滤。 |
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除菌过滤在储存或直接上柱之前进行,可以降低菌落数,避免下游出现内毒素的问题。使用聚偏二氟乙 |
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烯 0.22μm 除菌过滤器。 |
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对于空气过滤,聚丙烯是最常用的除菌、除病毒的空气过滤。 |
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